Incubare il recipiente a temperatura ambiente per 2-3 minuti . Le cellule saldamente aderenti possono essere staccate rapidamente a 37 °C. Osservare le cellule al microscopio. Le cellule staccate appaiono arrotondate e rifrangenti al microscopio.
Cosa succede se tripsinizzi le celle troppo a lungo?
L'incubazione di cellule con una concentrazione di tripsina troppo alta per un periodo di tempo troppo lungo danneggerà le membrane cellulari e ucciderà le cellule. Se non sei sicuro della concentrazione di tripsina da usare, usa una concentrazione bassa.
Come si tripsinizzano le cellule?
Le cellule possono essere risospese pipettando delicatamente la sospensione cellulare per rompere i grumi. Se necessario, è possibile effettuare un'ulteriore diluizione per il conteggio delle cellule e/o la subcoltura.
Quanto tempo ci vuole per allegare le celle?
le prime celle si attaccano già dopo 3-5 min! Nella mia esperienza, la maggior parte degli EC sono stati collegati dopo 10-20 minuti. Ma più aspetti, più fermo è l'attaccamento.
Fa male Tripsinizzare le cellule per due giorni di seguito?
Sì, è dannoso se stai provando continuamente le tue cellule dopo 24 ore di scissione. È consigliabile eseguire la scissione dopo 48 ore di scissione. … Puoi mantenere le cellule fino a quando la morfologia non è buona (dipende dal tipo di cellula, alcune cellule possono arrivare fino a 80 passaggi e altre fino a 10).
