Caricamento degli anticorpi di controllo sono controlli importanti in quanto indicano lo stesso carico di campioni in tutti i pozzetti. I controlli di caricamento indicano anche il corretto trasferimento delle proteine alla membrana durante il processo di western blotting. I controlli di caricamento sono in genere proteine con un'espressione elevata e onnipresente.
Cosa fa un controllo di caricamento?
Un controllo di caricamento è una proteina utilizzata come controllo in un esperimento di Western blotting. … Sono usati per assicurarsi che la proteina sia stata caricata equamente in tutti i pozzetti.
Perché usiamo un controllo di caricamento in Western blot?
I controlli di caricamento hanno un secondo ruolo come controllo nei western blot. Possono essere usati per verificare che vi sia stato un trasferimento uniforme dal gel alla membrana attraverso l'intero gel. Questo è fondamentale quando si confrontano i livelli di espressione proteica tra i campioni.
Come usi il controllo del caricamento in Western blot?
I segnali dei controlli di caricamento vengono generalmente utilizzati per normalizzare i segnali delle proteine di interesse. Per utilizzare un controllo di carico per questi scopi, il rilevamento con l'anticorpo della proteina di controllo e l'anticorpo sperimentale deve essere eseguito sulla stessa macchia. Una varietà di proteine differenti sono usate come controlli di caricamento.
Perché l'actina viene usata come controllo del caricamento?
Beta-actina, viene solitamente utilizzata come controllo del caricamento per Western Blot anormalizzare i livelli di proteine rilevate confermando che il carico proteico è lo stesso nel gel.
