Il prodotto della digestione di restrizione può essere facilmente conservato a -20°C. A 4°C andrebbe bene ma per garantire che non ci sia attività e nessuna attività stellare è consigliato di mantenerlo a -20 C.
Come si conserva il DNA digerito?
Prova conservando la fetta di gel in frigorifero per una notte, o anche sciogliendo la fetta nel tampone e congelandola a -20°C o -80°C. La degradazione del DNA avverrà alla stessa velocità e nelle stesse condizioni del DNA solubile, quindi usa una temperatura più fredda per una conservazione più lunga.
Cosa significa per un plasmide essere digerito?
Il DNA plasmidico purificato viene digerito con 1 o più enzimi di restrizione (RE) selezionati per fornire un modello di banda del DNA distinto che può essere facilmente risolto mediante elettroforesi. … In genere vengono selezionati enzimi di restrizione che tagliano all'interno del sito di clonazione multiplo (MCS) e determinano un pattern diagnostico di 2-5 bande facili da risolvere.
Come si conservano i plasmidi linearizzati?
Se sei preoccupato per gli effetti a valle di TE, conserva il DNA a una concentrazione più alta e diluisci quando necessario, oppure usa "TE basso" che è 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. quando il DNA o l'RNA sono puliti, possono essere conservati a -20°C per molti mesi senza alcuna degradazione.
Per quanto tempo puoi mantenere la digestione delle restrizioni?
Pro-Tip A seconda dell'applicazione e della quantità di DNA nella reazione, il tempo di incubazione può variare da 45 minuti a una notte. Per le analisi diagnostiche, 1-2 ore sono spesso sufficienti. Per digerire con >1 µg di DNA utilizzati per la clonazione, si consiglia di digerire per almeno 4 ore.